微量法 淀粉含量檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱: 淀粉含量檢測試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名: Micro Starch Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC0705        產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣     產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：560
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: 淀粉含量檢測試劑盒|淀粉檢測試劑盒|淀粉|試劑盒

簡要介紹：
淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體35mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明：
淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。
利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟：
一、淀粉提取：

1. 稱取0.1g-0.2g樣品（建議稱取約0.1g樣本）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常溫離心5min，棄上清，留沉淀。
2. 沉淀中加入0.5mL蒸餾水，放入95℃水浴中糊化15min（蓋緊，以防止水分散失）。
3. 冷卻后，加入0.35mL試劑二，25℃提取15min，振蕩3-5次。
4. 加入0.85mL雙蒸水，混勻，3000g，25℃離心10min，取上清液待測。

二、測定操作表：

1. 分管光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長620nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 調(diào)節(jié)水浴鍋 95度。
3. 工作液的配制：臨用前在試劑三中加入3.75mL蒸餾水后，緩慢加入21.25mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。
4. 樣本測定：取50μL樣本和250μL工作液EP管中，95度水浴10min（蓋緊，防止水分散失），自然冷卻室溫，取200μL微量石英比色皿或96孔板中，在620nm波長下記錄測定吸光值A。

三、淀粉含量計算：
A、用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 5.872x - 0.0295；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1. 按照蛋白濃度計算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2. 按樣本鮮重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
B、用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 2.936x - 0.0295；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

3. 按照蛋白濃度計算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷(V1×Cpr) =0.34×(A+0.0295) ÷Cpr

4. 按樣本鮮重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷2.936÷ (W×V1÷V2) =0.578×(A+0.0295) ÷W
V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項：

1. 由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。
2. 若吸光值大于1，請將樣本用提取液稀釋后再測定，計算公式中乘以相應的稀釋倍數(shù)。
3. 提取液的配置：0.35mL試劑二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。
4. 低檢測限為10μg/g 鮮重或100ng/mg prot。

相關(guān)文獻：
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《Identification and Characterization of an Arabidopsis thaliana Mutant lbt With High Tolerance to Boron Deficiency》 作者:Zexun Huai, Lishun Peng, Sheliang Wang, Hua Zhao, Lei Shi and Fangsen Xu 期刊:frontiers in plants science 影響因子:4.106 PMID:29915610
《Giant Pandas Are Macronutritional Carnivores》 作者:Yonggang Nie,Fuwen Wei 5,Wenliang Zhou,Yibo Hu,Alistair M. Senior,Qi Wu,Li Yan,David Raubenheimer 期刊:Curr. Biol. 影響因子:9.193 PMID:31056385

 

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