產(chǎn)品名稱:小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
產(chǎn)品型號:P8620
產(chǎn)品特點:小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒品牌:Solarbio | 貨號:P8620 | CAS:單位 : 盒 外觀(性狀) : 液體 儲存條件 : 18℃-25℃避光保存
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小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
本分離液為Ficoll、羥乙基淀粉550與泛影酸葡jia胺的混合液。抗凝外周血可在分離液中分層。離心時,在Ficoll、羥乙基淀粉的作用下紅細(xì)胞與粒細(xì)胞聚集并迅速沉降;此時,淋巴細(xì)胞及其他單個核細(xì)胞仍處于分離液上層,紅細(xì)胞污染可忽略不計。大部分血小板可在細(xì)胞清洗低速離心過程中去除。 其他人及動物多種比重細(xì)胞分離液,因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,用戶在制定分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細(xì)胞的名稱。
小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
注意事項:
A.本實驗要求,在正常大氣壓下,分離液、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃。分離液在低溫時呈較高密度,在高溫時呈較低密度。細(xì)胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,操作前可將樣本和分離液復(fù)溫18-22℃。為獲得實驗結(jié)果,建議在取血后2小時內(nèi)進(jìn)行實驗,血液提取后存放時間越長細(xì)胞活性越低。
B.實驗過程中,如需稀釋血液或洗滌細(xì)胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會導(dǎo)致血細(xì)胞凝集,大大降低細(xì)胞得率及純度。
C.you抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素,其他抗凝劑也可使用,但會影響細(xì)胞活性。應(yīng)注意在血液稀釋過程中去除抗凝劑體積。
D.實驗操作時,不可使用含粉手套、不可使用內(nèi)毒素含量過高的液體,手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會激活淋巴細(xì)胞從而降低細(xì)胞得率及活性。
E.本實驗不可使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁影響分離效果。推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
F.吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。吸取過多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
G.如需進(jìn)行B、T細(xì)胞計數(shù),則需血液貯藏時間不得多于10小時,否則將導(dǎo)致細(xì)胞被激活,得率降低。
H.為去除所混雜的血小板,可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進(jìn)行二次離心。
I.細(xì)胞純度可在步驟10后使用瑞氏染色方法確定,細(xì)胞活性可用臺盼藍(lán)處理后觀察。
J.由于各品牌離心機(jī)的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時間,摸索jia的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
參考文獻(xiàn):
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《Immunogenicity evaluation of MS2 phage-mediated chimeric nanoparticle displaying an immunodominant B cell epitope of foot-and-mouth disease virus》 作者:Guoqiang Wang, Yunchao Liu, Hua Feng, Yumei Chen, Suzhen Yang, Qiang Wei, Juan Wang, Dongmin Liu, Gaiping Zhang 期刊:PeerJ 影響因子:2.353 PMID:29844975
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