干貨分享
常用的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法匯總(一)
讓我們一起學(xué)習(xí)一下吧~
細(xì)胞凋亡是一個(gè)進(jìn)程,該期間凋亡相關(guān)通路被激活,各種分子參與調(diào)控,出現(xiàn)一系列的凋亡特征。例如細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面,磷脂酰絲氨酸(PS)從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外;又例如當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),染色質(zhì)相較正常細(xì)胞而言會(huì)固縮。因此,通過(guò)檢測(cè)相應(yīng)的指標(biāo)可鑒定凋亡水平。
本文分享了常見(jiàn)的幾種細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法,讓我們一起學(xué)習(xí)一下吧~
形態(tài)學(xué)檢測(cè)
發(fā)生凋亡的細(xì)胞在形態(tài)上有一定的特征:相較正常細(xì)胞而言,凋亡細(xì)胞體積變小,凋亡Ⅰ期的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象(cavitations)的空泡結(jié)構(gòu);Ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;凋亡晚期,細(xì)胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體。在透射電子顯微鏡下可看到凋亡細(xì)胞體積變小,表面微絨毛消失,細(xì)胞質(zhì)濃縮。使用核染料(Hoechst系列、DAPI)染色后,在激光共聚焦掃描顯微鏡下可看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染或細(xì)胞核裂解成碎塊狀呈致密濃染。
膜通透性改變
細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),細(xì)胞膜通透性會(huì)逐漸降低。Hoechst系列可以穿透細(xì)胞膜,染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。膜不可滲透性染料(例如:Propidium Iodide/PI)不能穿透細(xì)胞膜,對(duì)于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞不能染色。而對(duì)于壞死細(xì)胞,其細(xì)胞膜的完整性喪失,膜不可滲透性染料染料可以染色壞死細(xì)胞。根據(jù)此特性,使用Hoechst系列和PI染料雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)時(shí),正常細(xì)胞為弱紅色熒光+弱藍(lán)色熒光,凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光,壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光。
磷脂酰絲氨酸(PS)
翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜外
細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面,這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外,使PS暴露在細(xì)胞膜外表面。PS是一種帶負(fù)電荷的磷脂,正常主要存在于細(xì)胞膜的內(nèi)面,在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)細(xì)胞膜上的這種磷脂分布的不對(duì)稱性被破壞而使PS暴露在細(xì)胞膜外。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所專屬的,也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的,而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就破壞了。
Annexin V具有易于結(jié)合到磷脂類如PS的特性,對(duì)PS有高度的親和性。因此,該蛋白可充當(dāng)一敏感的探針檢測(cè)暴露在細(xì)胞膜表面的PS。7-AAD是一種非滲透性的核酸熒光染料,該染料不能透過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜,但可穿透膜損傷細(xì)胞如晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜并與其內(nèi)的DNA結(jié)合,可用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。因此,可以采用AnnexinV與7-AAD雙染的方法,通過(guò)流式檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡。
關(guān)于我們
Solarbio作為一家小分子化合物供應(yīng)商,不僅擁有數(shù)千種可以滿足體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)的純度要求的小分子抑制劑&激活劑&拮抗劑系列;同時(shí),還包含高活性的多肽&蛋白&抗原抗體系列,高效價(jià)的抗生素系列,高純度的染料&探針和高品質(zhì)的輔料系列(助溶劑&增溶劑、氨基酸&維生素&糖類、反應(yīng)底物&理化檢測(cè)),旨在搭建科研試劑一站式平臺(tái),以滿足不同科研黨的實(shí)驗(yàn)需求。
高質(zhì)量、高純度、高重復(fù)性—Solarbio小分子化合物均已通過(guò)NMR和HPLC驗(yàn)證,具有較高的藥用活性和良好的細(xì)胞滲透性等優(yōu)點(diǎn)。
種類全、覆蓋廣、發(fā)貨快—目前已有數(shù)千產(chǎn)品、萬(wàn)余規(guī)格,涵蓋上百種通路靶點(diǎn)。同時(shí)在全國(guó)設(shè)立了多個(gè)倉(cāng)庫(kù),以保證第一時(shí)間響應(yīng)客戶的需求。
更新快、資料全—Solarbio一直定期查訪最新的科學(xué)研究和客戶反饋,及時(shí)更新、豐富產(chǎn)品信息,以確保提供全面的試劑和豐富的數(shù)據(jù)支持。
安全有效—Solarbio小分子化合物的安全性和有效性已經(jīng)被大量文獻(xiàn)證實(shí),客戶可以隨時(shí)登錄我公司查詢對(duì)應(yīng)產(chǎn)品的文章發(fā)表情況。
相關(guān)新聞
01
Solarbio買小分子化合物
+9.9換購(gòu)助溶劑
即日起,凡訂購(gòu)任意Solarbio小分子化合物產(chǎn)品線產(chǎn)品,均可享受+9.9換購(gòu)10ml助溶劑。DMSO、PEG300、Tween80、玉米油任選~
02
小分子化合物全線產(chǎn)品
累計(jì)滿贈(zèng),雙禮任選
2025年03月01日至04月30日期間,凡是購(gòu)買Solarbio小分子化合物系列產(chǎn)品,價(jià)格累計(jì)滿一定金額,即可獲贈(zèng)對(duì)應(yīng)京東卡或精美禮品。購(gòu)買數(shù)量越多,獲贈(zèng)越多,上不封頂,多買多贈(zèng)呦~
03
Solarbio小分子化合物試用裝
免費(fèi)申領(lǐng)
為答謝廣大客戶對(duì)我公司的長(zhǎng)期支持和信賴,考察產(chǎn)品在市場(chǎng)中的口碑與反響,索萊寶推出了約百種小分子化合物的小規(guī)格試用包裝供您選擇申請(qǐng),數(shù)量有限,先到先得。
版權(quán)所有 ICP備案號(hào): 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 總流量:1010360 網(wǎng)站地圖