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技術(shù)服務(wù)案例分享|茶葉中茶氨酸的含量檢測


茶氨酸(Theanine)是茶葉的特征氨基酸,也是茶葉呈味物質(zhì)之一,茶葉存在二十多種氨基酸中,茶氨酸約占茶葉氨基酸總量50%~60%,在鮮葉中茶氨酸含量約占茶葉干重的1~2%。研究表明茶氨酸具有抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老等多種生物活性。

某用戶制得兩種茶葉樣本,希望索萊寶代檢其中茶氨酸的含量,作為評價樣本優(yōu)劣的指標(biāo)之一。

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茶葉中茶氨酸經(jīng)沸水加熱提取,凈化處理后,用高效液相色譜儀進行測定,用標(biāo)準(zhǔn)品進行定性和定量。



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由于樣本處理與檢測方法無需開發(fā),該樣本收到后次日即得檢測結(jié)果,報告于次日發(fā)予客戶。


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3.1.樣品信息

收到茶葉樣品兩個,a和b。

3.2.材料與方法

所有的溶劑與試劑均為色譜級,茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品選用的是索萊寶產(chǎn)品(ST8430  L-茶氨酸)。

3.3.樣品制備

茶氨酸提取方法

(1)茶葉樣品經(jīng)磨碎混勻后,稱取1.0g(準(zhǔn)確至0.01g)試樣;

(2)加沸蒸餾水,置于100℃的恒溫水浴鍋中浸提30min;

(3)0.45μm水相濾膜過濾,作為代測液備用;


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本實驗所用的儀器為高效液相色譜儀,配備紫外檢測器,色譜柱為C18 (250*4.6mm 5μm ),流動相A:純水,流動相B:乙腈,洗脫梯度如下:

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茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:

分別將1mg/ml的茶氨酸儲備溶液稀釋為對應(yīng)濃度的茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液。0.45μm水相濾膜過濾。

 待流速和柱溫穩(wěn)定后,進行空白運行,準(zhǔn)確吸取一定量茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液注射入HPLC,在相同的液相色譜條件下注射同等量測試液,測試液以峰面積定量,由色譜峰的峰面積可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出相應(yīng)的茶氨酸的濃度,測試液中的茶氨酸的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測定的線性范圍之內(nèi)。

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茶氨酸 標(biāo)準(zhǔn)品


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樣本a


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樣本b



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結(jié)



茶葉中茶氨酸含量按式中計算:

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X—樣品中茶氨酸的含量,單位為克每千克(g/kg)

c—樣品濃度,單位為毫克每毫升(mg/mL)

V—最后總定容后樣品的體積,單位為毫升(mL)

m—樣品的質(zhì)量,單位為克(g)

w—樣品的干物質(zhì)含量(質(zhì)量分數(shù))%


標(biāo)準(zhǔn)曲線:

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綜上,可計算出a.b兩個茶葉樣本中,茶氨酸的具體含量。


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索萊寶提供的報告資料


1

詳細的實驗步驟

2

相關(guān)色譜參數(shù)

3

色譜圖片

4

液相色譜原始數(shù)據(jù)

5

計算得出的含量信息




聲明:該技術(shù)服務(wù)案例的分享已獲得用戶的同意,并將實驗關(guān)鍵信息根據(jù)用戶的要求進行了對應(yīng)刪減。






索萊寶基于自身搭建分析檢測平臺,提供的高效液相色譜技術(shù)服務(wù),可以快速、準(zhǔn)確的進行物質(zhì)的定性、定量分析。先進的儀器設(shè)備、專業(yè)的技術(shù)團隊、嚴格的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn),保障實驗方案的科學(xué)性、穩(wěn)定性、重復(fù)性。

服務(wù)項目主要包括:

1) HPLC方法學(xué)開發(fā)和驗證

2) 物質(zhì)含量的測定

3) 中藥指紋圖譜研究

4) 藥物(天然產(chǎn)物/原料藥及其雜質(zhì))

    分離純化

5) 物質(zhì)結(jié)構(gòu)確定

6) LC/LC-MS/NMR檢測



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