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常見實驗問題
1.M與mol/l的換算關(guān)系?
M即mol/l,mM即mmol/l,μM即μmol/l,nM即nmol/l,pM即pmol/l,fM即fmol/l。 1M=103mM=106μM=109nM=1012pM=1015fM
2. 凍存試劑或樣品可以室溫或37℃水浴解凍嗎?
凍存試劑或樣品的解凍,如果時間比較充裕,建議在冰浴或冰水浴上緩慢解凍。如果時間比較著急,大多數(shù)凍存的試劑或樣品是可 以在室溫或37℃水浴解凍(例如抗生素一些產(chǎn)品不建議客戶37度水浴),但都必須特別小心,必須邊觀察、邊輕輕晃動、邊融解。待 部分溶解后即需從水浴中取出,確保溶解過程中試劑或樣品還是接近0℃的。如果該試劑或樣品在0℃不會結(jié)凍,解凍后可以置于冰浴或冰水浴。
3. 離心力(×g)和每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)如何換算?
轉(zhuǎn)速有離心力(×g)和每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)兩種表示方式,有些離心機設(shè)置有rpm和xg顯示,但普通離心機沒有自動切換功能。需要用下面的公式進行換算: g=r×11.18×10-6×rpm2 (r 為有效離心半徑,即從離心機軸心到樣品中心位置的長度,單位為厘米) 例如: 轉(zhuǎn)速為3000rpm,有效離心半徑為10 cm, 則離心力=10×11.18×10-6×30002=1006.2(×g)。
4. 微量液體試劑如何量取?
(1)在開啟裝有微量試劑的離心管之前,宜先適當(dāng)離心(500-2000rpm離心5秒即可)。這一步很重要,目的是將因運輸顛倒而粘于管壁和蓋子上的試劑收集至管底以供使用。 (2)微量液體樣品宜盡量減少量取次數(shù),以減少不必要的損耗。每多量取一次會損耗0.5-數(shù)微升不等的試劑,例如總體積為100μl的試劑,每次量取5μl,通常不太可能量取20次的。 (3)事先計算好樣本數(shù)量和試劑使用量,一次性量取配制出一定量的工作液后,再分裝至各反應(yīng)管之中。這樣可以減少試劑量取的次數(shù)。 (4)最好使用經(jīng)校驗的、精密度高、合適量程的微管移液 槍及槍頭,否則會有超乎想像的誤差和損耗。如果是連續(xù)量取,每次量取都宜更換槍頭,否則會導(dǎo)致第一次吸取后每次的吸取體積明顯偏大。 (5)移液槍吸取操作時,宜垂直進入液面數(shù)毫米。槍頭通常不宜直接插入管底,略低于液面即可,避免試劑過多粘于槍頭造成損耗。慢吸,緩慢松開控制按鈕,否則液體進入吸頭過速會導(dǎo)致少量 液體倒吸入移液器內(nèi)部,導(dǎo)致最終打出時的體積減少。 (6)打出液體時槍頭貼壁并有一定角度,慢放,即緩慢打出液體。
5. 微量對于微量粉末試劑如何操作及使用?
(1)在開啟裝有微量試劑的離心管之前,宜先適當(dāng)離心(500-2000rpm離心5秒即可)。這一步很重要,目的是將因運輸顛倒而粘于管壁和蓋子上的試劑收集至管底以供使用。 (2)對于10mg或以下的微量固體樣品,通常不建議再使用天平進行稱量,而宜直接按照產(chǎn)品標(biāo)簽上標(biāo)示的量進行溶液的配制。例如5mg的粉末試劑,很多時候很難從離心管中全部取出來的,但可以 在該離心管內(nèi)全部配制成適當(dāng)?shù)娜芤骸τ诹柯远嘁恍┑奈⒘糠勰悠?,也宜盡量減少稱量次數(shù),通常建議每次稱量的重量不少于10mg。多次微量的稱量可能會由于稱量誤差導(dǎo)致每次的檢測結(jié)果 產(chǎn)生偏差。對于微量的粉末,如果不涉及溶液保存的穩(wěn)定性方面的問題,通常建議一次性將所有的粉末試劑按標(biāo)注的劑量配制完畢。 (3)如果需要稱量,請注意使用靈敏度較高的分析天平,使用前進行校準(zhǔn)。另外,稱量時不建議帶乳膠手套(可以戴一次性薄膜手套),以防止乳膠手套和稱量紙之間產(chǎn)生的靜電影響稱量的準(zhǔn)確性。 稱量20-30mg或更小重量時,不可以戴乳膠手套。我們測試過的多種乳膠手套(包括某些品牌的進口乳膠手套),在用乳膠手套接觸(摩擦)稱量紙后會產(chǎn)生靜電,從而會影響稱量的準(zhǔn)確性,誤差可以 達到數(shù)毫克。而使用聚乙烯材質(zhì)的薄膜手套,即所謂的PE薄膜手套(類似于保鮮膜材質(zhì)),接觸稱量紙則不會產(chǎn)生靜電,此時誤差較小。
6. 試劑或試劑盒存放時搞錯保存溫度,是否會影響其使用效果或是否能繼續(xù)使用?
對于很多試劑雖然要求低溫保存,但這是長期保存的條件,很多時候是可以在4℃甚至室溫短時間保存的。對于具體的某種試劑或試劑盒是否可以繼續(xù)使用,請設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品 或陽性對照進行檢測,如果標(biāo)準(zhǔn)品或陽性對照的檢測結(jié)果正常即可繼續(xù)使用。
7. 試劑已經(jīng)變色是否還能用?
不能用。試劑變色通常由于試劑的不穩(wěn)定引起,變色很多時候表明試劑已經(jīng)變質(zhì)。對于需要低溫或避光保存的試劑一定要低溫或避光保存。


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